前言
肝纤维化(liver fihrosis)肝硬化(liver cirrhosis)是慢性肝病演变中一个一连希望的历程，临床上难以将两者截然脱离。肝纤维化是病理学上的看法，而肝硬化是一种慢性疾病的临床诊断名称。两者的区别在于临床上肝纤维化没有特定的症状和体征，而肝硬化有临床诊断和辅助检查的诊断指标，以肝功效损害和门脉高压症(portal hyperteasion)为主要体现，并有多系统受累，晚期常泛起上消化道出血、肝性脑病、继发性熏染。肝硬化的爆发生长必需经由三个基本环节：肝细胞重复炎症和坏死肝纤维化的形成、天生肝细胞再生结节，形成假小叶，逐渐损失功效。病理组织学上有普遍的肝细胞坏死、剩余肝细胞结节性再生、结缔组织增生与纤维距离形成，导致肝小叶结构破损和假小叶形成， 肝脏逐渐变形、变硬而生长为肝硬化。理想的肝硬化动物模子应具有人类肝硬化的基本形态特征，病理改变呈阶段性希望，且造模要领简朴、乐成率高、重现性好、动物殒命率低等特点。由于肝硬化病因的多样性、动物和人的种属差别等，只管海内外学者已经建设了一些较量成熟的肝硬化动物模子，包括化学性、酒精性、免疫性、胆汁淤积性和血吸虫性等肝硬化模子，但每种模子的致病因素差别，爆发肝硬化的详细机制、稳固性、重复性以及与人患病历程相似水一律也都不尽相同，迄今仍缺乏理想的肝硬化动物模子。
部分造模要领
使用动物：大鼠、小鼠、家兔、犬、猫
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给予动物具有肝毒性的化学物质，致使机体爆发慢性肝脏损害，最终导致肝硬化。现在应用较多的有四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)、硫代乙肽胺(thioacetarnide,TAA)、二甲基亚硝胺(nitrosodimethylamine,DMN)。
CCl4是诱导实验动物爆发肝纤维化和肝硬化最普遍使用的化学性肝毒物。CCl4经肝微粒体内依赖于细胞色素P450的氧化酶CYP2E1激活后，爆发自由基CCl3-及Cl，它们与肝细胞内大分子爆发共价团结，引发活性氧自由基的爆发和脂质过氧化损伤肝细胞，从而导致贮脂细胞活化，释放出Ⅳ型胶原酶，降解Ⅳ型胶原。同时该细胞由合身渗透Ⅲ型胶原改为合身渗透Ⅰ型胶原，取代了Ⅳ型胶原，促使肝脏纤维化。TAA会延伸肝细胞有丝破碎历程，并阻碍RNA从胞核到胞质的转移，影响依赖酶的代谢历程，导致肝细胞坏死，引起间质内结缔组织的天生增多。DMN经肝微粒体代谢为甲醛和甲烷亚硝胺，使核酸、卵白质爆发甲基化反应，随后导致肝细胞坏死或凋亡，细胞外基质举行性增添。
【造模要领】：
纯粹CCl4诱导模子一样平常接纳30％~50％CCl4油溶液，给药途径有口服、腹腔注射 及皮下注射，时间依给药途径和剂量差别，8周～4个月不等。所用动物包括大鼠、小鼠、家兔、犬、猴等。
大鼠：可用60%CCl4橄榄油溶液以3ml/kg给雌性Sprague Dawley大鼠皮下注射，每周2次，共12周；或用液状石蜡配制15%CCl4溶液，按0.75ml/ kg腹腔注射，每周3次，共6周；用橄榄油将CCl4 配成40％的溶液，首次按体重5ml/kg皮下注射，以后以3ml/kg注射，3天一次，共42天；30%CCl4溶液20ml/kg，每周2次，共7周。
小鼠：40%CCl4橄榄油4ml，一次性口服可诱发小鼠肝小叶中央坏死，CCl4油剂皮下注射1~3ml/kg，每周2次，肝硬化可在12~15周形成。
家兔：模子用CCl4 12m1/kg一次性口服，可诱发兔肝小叶中央坏死，用CCl4 10ml/kg一次性口服，可诱发兔急性中毒性肝坏死。
犬：模子用CCl4溶液按12ml/kg，配以等量花生油，清早空腹经腹腔注射，每周注射2次，共注药8周，形成肝硬化。
猫：模子用3ml/kg CCl4皮下注射，可诱发猫肝小叶中央坏死、脂肪肝。
复合CCl4诱导肝硬化模子：CCl4＋乙醇＋高脂肪饮食诱导肝硬化是现在较为常用的要领，大鼠皮下注射40% CCl4（花生油以4:6配成，第1次用5ml/kg，以后每隔3天注射3ml/kg)，接纳高脂低卵白食物（以玉米面为饲料，加0.5％胆固醇，实验第1周、2周加20％猪油），30％乙醇为唯一饮料，第6周末即可形成肝硬化。肝硬化形成后饲料中加入2％的氯化钠可制作肝硬化腹水模子。CCl4油溶液＋乙醇灌胃＋胆固醇低胆碱饲料：大鼠皮下注射40%~50% CCl4油溶液(3ml/kg)，每周2次。第2 周最先，20%～30％乙醇隔日1ml灌胃，并给予混有0.5％胆固醇低胆碱饲料喂养，一连8周，大鼠肝脏正常结构破损，形成厚的纤维距离，并支解形成假小叶。
TAA诱导模子是专心理盐水配成30％的TAA溶液，作为大鼠的饮用水，一连饮用8周可爆发纤维化，17周爆发肝硬化。亦可对小鼠举行腹腔注射。
DMN诱导模子：大鼠按10mg/kg剂量，心理盐水稀释的1%DMN溶液腹腔注射，每周3次。
【模子特点】：
CCl4进入肝脏后引起肝小叶内中央肝静脉周围细胞坏死，引起纤维增生，而纤维增生以小叶内窦间隙为主，实验早期即可见显着的肝细胞损伤和炎症反应，CCl4复合造模法分期明确，第1周、2周以肝细胞变性坏死为主，3周、4周 以弥漫性纤维增生为其特征，第5周、6周，纤维距离、结节与假小叶形成。TAA溶液饮用诱导8周时会爆发纤维化，17周时爆发肝硬化，且各个体爆发纤维化的水平相当。DMN诱导造模周期短，第21天可见胶原纤维沉积，胆管增生，大鼠殒命率低。
【模子评估和应用】：
CCl4为主诱导的肝硬化模子所需时间依给药途径差别而有差别，弱点是殒命率较高，阻止造模给药后，有一定自然恢复趋势的弱点。CCl4复合造模法有助于研究外在因素对肝硬化历程的干预作用，但该要领用于小型动物较多，大型动物的实验较少，与人肝炎肝硬化仍有差别。CCl4＋乙醇＋高脂肪饮食是海内常用的造模要领，被普遍应用于体内研究肝纤维化爆发气制、血清学标记物与组织病理的相关性及抗纤维化的药 物筛选。TAA诱导模子宜作为影像学的肝纤维化研究。DMN诱导模子肝纤维化形成相对稳固，与人类肝硬化早期改变及胶原纤维沉积相似，可作为筛选抗纤维化药物的模子，现在在中医药抗肝纤维化和研究差别细胞外基质的爆发部位、评价肝纤维化血清标记物的可靠性等方面应用较多。
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