前言
眼部结构重大，发育时来自三个胚层：表皮外胚叶形成晶状体、泪腺、角膜和眼睑上皮层以及结膜和其隶属腺体 ；神经外胚叶形成视网膜、瞳孔开大肌和括约� � ；中胚叶形成眼外肌、眼眶和血管 。因而眼部虽然小，但爆发的肿瘤多样 。常见的有眼睑的基内情胞癌、睑板腺癌 ；角结膜的鳞状上皮癌、黑素瘤 ；眶组织的恶性血管内皮瘤、泪腺腺癌、横纹肌肉瘤 ；神经泉源的恶性胶质瘤、髓母细胞瘤 。这些肿瘤爆发于眼部，但都和全身其他系统肿瘤保存交集，不为眼科所特有 。婴幼儿眼部最常见的是视网膜母细胞瘤，成人为脉络黑素瘤 。
视网膜母细胞瘤(retinoblastoma, RB)是眼科常见儿童恶性肿瘤，属于神经外胚层肿瘤 。恒久以来RB，都是学者研究的重点 。最早发明的抑癌基因Rh，就是在对RB家系患者举行基因剖析时发明的 。1971年，Knudson又凭证在RB的爆发历程中要履历Rb基因的两次突变提出了“二次攻击”理论 。20世纪60年月最先，又有报道建设的多种RB肿瘤的细胞株，具有代表性的是外洋的Y79、WERI 以及我国中山眼科中心建设的SO-Rb50 。近年又发明纯粹Rb1基因的改变缺乏以诱发RB，RB患者往往还伴有P53通路基因的改变 。这些发明的每一步都伴有特定RB动物模子的应用和建设 。
部分造模要领
使用动物：小鼠
【造� ；啤浚�
不做任那里置简朴地将人类肿瘤异种移植到其他动物身上是不可能乐成的 。最初学者是使得实验动物接受放射线照射、胸腺摘除或者给予抗T细胞抗体，但由于抑制作用有限，实验经常失败 。无胸腺裸鼠一经发明就成为研究胸腺、免疫以及肿瘤的理想动物 。现在已经发明可以生长于裸鼠的有黑素瘤、恶性胶质瘤以及结肠、胰腺、肺、乳腺、肾、前线腺、宫颈等人类肿瘤 。关于大大都肿瘤，移植成瘤后的自行消退是造模失败的主要缘故原由 。但视网膜母细胞瘤起源于光感受器前体细胞，生长于视网膜内，这种剖解位置的特殊性使得视网膜母细胞瘤的裸鼠异位移植保存多种部位 。厥后发明并培育的SClD、OD、NOG小鼠，更为RB研究提供了理想的移植平台 。
【造模要领】：
1.皮下移植 以SO-RB50细胞为例 。NOD/CID小鼠左侧腹股沟皮下接种SO-RB50细胞悬液0.2ml，细胞密度为1×107个 。12~19天最先成瘤，成瘤率90％ ；20天后移植瘤泛起快速生长 。皮下注射成瘤时间和成瘤率与裸小鼠的品种以及肿瘤细胞的活性关系亲近 。同样，SO-RB50注射到BALB/c裸鼠颈背部皮下，皮下成瘤率仅1/7，成瘤潜在期为4周 ；而将新鲜RB组织接种到BALB/c裸小鼠皮下，成瘤率更低，注射时需要更高的肿瘤浓度 。
2.前房或玻璃体内移植 全麻后用复方托吡卡胺滴眼液散瞳，用微量注射器吸收5µl密度为107个/ml RB细胞悬液，自角巩膜缘部位注射入裸鼠的前房 。也可选用新西兰明确兔 。明确兔虽然保存健全的免疫系统，可是眼内特殊的结构形成了前房免疫赦宥，使得前房注射成瘤成为可能 。注射细胞密度为4×108个/ml，造模前3d最先给予含环孢菌素A滴眼液，4次／天 。前房内肿瘤可以保存30天以上，但难以确保一连保存，对实验有诸多限制 。
3.视网膜下异位移植 吸收RB细胞悬液10µl，细胞密度5.0×106个/ml 。散瞳、麻醉BALB/c裸鼠后显微镜下角膜缘内穿刺进入前房，钝性微量注射针经该穿刺道进入前房，穿过晶状体悬韧带（注重勿伤及晶状体），将晶状体拨挤到一侧 。微量注射针抵达视网膜下后，在微量泵控制器控制下注射0.5µl细胞悬液于视网膜下 。
【模子特点】：
前房或玻璃体注射，注射后3天可见玻璃体腔内泛起污浊 ；注射后6天玻璃体腔内可见灰白色肿瘤团块 ；注射后9天，角膜污浊，眼内结构不可见 ；注射后12天，眼球突出，眼内结构破损 。视网膜下注射，3周后眼玻璃体腔内可见游离肿瘤团块 ；4周后眼球内可见实性肿物突出，眼球结构破损 。裸鼠体重最先下降 ；注射5周后肿瘤突出眶外，裸鼠体重显着下降 。
【模子评估和应用】：
裸鼠皮下接种视网膜母细胞瘤的动物模子有成瘤率低、成瘤潜在期长的特点 ；并且不易见到肿瘤远处转移 。这可能与裸鼠剩余的B淋巴细胞及NK细胞对肿瘤转移的抑制作用有关 。同时肿瘤的生长情形与眼内情形差别很大，无法评估眼内微情形对肿瘤生长的影响，也无法同步显示肿瘤生长对眼球的侵袭、破损 。玻璃体或者前房内注射更易成瘤，也可显示肿瘤生长对眼球的破损以及对眼球的局部浸润，但其实质更靠近于RB细胞的玻璃体腔作育，与RB真实的爆发生长还保存一定差别 。视网膜下注射无疑最为靠近肿瘤生长的自然历程，但操作难题，需要一定的装备和手艺 。
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