前言
年岁相关性黄斑变性(age related macular degeneralion, AMD)是65岁以上晚年人致盲的主要缘故原由。AMD分为无新生血管天生的干性以及新生血管天生的湿性体现。湿性AMD患者爆发CNV是导致视力损失的最常见因素。本章将先容CNV的造模要领。
部分造模要领
使用动物：小鼠、家兔、猕猴
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激光诱导CNV模子是常见的要领。1979年 ，Ryan等首次接纳高功率激光穿透Bruch膜制作出CNV动物模子。1989年 ，Dobi品级一次应用647nm波长、120mW的氪激光可造成CNV模子。1998年 ，Tobe等将氪激光光凝术应用于制作小鼠CNV模子 ，以后激光诱导CNV模子被普遍应用于基础实验和治疗要领的研究中。蓝绿氩激光穿透力较弱 ，主要作用于视网膜内层和RPE层。氪激光主要作用于RPE和脉络膜内层。激光诱导CNV模子的优点在于与人类CNV疾病爆发自然历程相似 ，但差别研究CNV模子乐成率差别 ，与差别实验接纳动物类型、激光种类及对视察诊断CNV的标准纷歧有关。
【造模要领】：
1.小鼠 双眼滴用复方托吡卡胺滴眼液散瞳 ，腹腔注射1％戊巴比妥钠(10ml/kg)麻醉小鼠 ，实验眼滴用医用透明质酸钠凝胶 ，眼前安排2cm×2cm盖玻片 ，经裂隙灯用532nm激光功率200mW ，光斑直径100m ，曝光时间100毫秒 ，距视乳头1.5-2.0PI左右位置以视乳头为中心举行光凝 ，其中行CNV模子判断和免疫荧光染色组小鼠光凝4~6点／眼；光凝后有气泡爆发标记击破Bruch膜 ， 记为有用点。
2.家兔 兔眼激光诱导模子在海内应用较为普遍 ，优点在于兔眼较之鼠眼大 ，易于模子实验操作与检查。双眼散瞳 ，眼表滴入外貌麻醉。每只眼在全视网膜镜下用氪激光 ，波长647nm ，功率700~800mW ，光斑直径50µm ，激光功率曝光时间0.05秒 ，在视乳头及髓线下方光凝20个点 ，光斑距离300µm。
3.猕猴 猴的视网膜及黄斑结构与人类相似 ，眼球巨细便于操作 ，具有荧光渗漏的特点 ，是用于临床药物筛选的首选模子。Ryan等使用氩激光 ，功率200~950mW ，光斑直径50~200µm ，曝光时间0.1~0.5秒。
【模子特点】：
1.小鼠 常接纳免疫组化手艺应用CD31标记内皮细胞 ，在光疑后14天时CNV模子鼠的视网膜光激部位可见显着的绿色荧光团块 ，批注新生血管形成 ，从而体现CNV模子诱导乐成。
2.家兔 激光斑泛起强荧光渗漏为CNV形成 ，第3~4周见稳固的渗漏光斑 ，CNV爆发率66.7％ ，渗漏率51.7％。光凝后3天即有少量光斑泛起荧光渗涌 ，并逐渐增多 ，21天达岑岭 ，并一连到光凝后56天。OCT显示造模后7天少量光斑部位色素上皮层反射中止 ，其下方局灶性高密度红白色反射区呈团块状、梭形或不规则形 ，边沿为瘢痕形成的不规则强反射区 ，CNV泛起；之后CNV逐渐增多 ，至21天各组达最多；晚期部分CNV瘢痕化。荧光渗漏的盘算[（荧光渗漏爆发率＝泛起荧光渗漏的激光点数／所视察的激光点数）×100％]。
3.猴 光凝猴视网膜泛起新生血管以及眼底血管荧光造影视察泛起血管渗漏 ，为乐成建设了CNV动物模子。但相比鼠类和家兔 ，非人类灵长类的CNV渗漏率较低约30％ ，三度损伤约占70％ ，四度损伤约为20％~40％。实验组应选用8~10只猴才华获得具有统计学意义的效果。由于猴泉源少 ，用度高 ，饲养较难题 ，模子制作需4周以上 ，因此应用受限。
【模子评估和应用】：
小鼠激光诱导CNV模子的乐成率约为80％ ，兔的激光诱导CNV模子的乐成率约50％ ，而选用非人类灵长类动物激光诱导CNV模子的乐成率最低约30％。激光诱导CNV动物模子可模拟人类湿性AMD疾病 ，接纳这种要领直接损伤脉络膜 ，与人类CNV保存配合之处 ，关于研究湿性AMD的发病机制与治疗要领有主要的临床价值。
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