前言
艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)在1981年首次发明于美国 ，随后确定其病原体为人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV),HIV展于反转录病毒属成员 ，是一种熏染人类免疫系统细胞的慢病毒。病毒基因组由两条相同的正链RNA组成 ，全长9.8kb ，划分编码Gag、Pol,Env结构卵白及Tat、Rev、Vpu、Vpr、Vif、Nef等辅助卵白。HIV有两种血清型 ，划分是HIV-1和HTV-2 ，最常见的为HIV-1熏染。HIV撒播途径主要包括性撒播、血液撒播和母婴撒播等途径举行撒播 ，熏染后主要侵占免疫细胞 ，包括T细胞、单核巨噬细胞、树突状细胞等。细胞外貌表达的CD4分子是HIV受体 ，HIV囊膜糖卵白gp120与细胞膜上CD4分子团结后可导致熏染的爆发 ，AIDS患者临床体现以CD4+T淋巴细胞举行性镌汰和免疫缺陷为特征 ，常伴有实质器官（脑、淋投合和肺等）的炎性疾病、神经障碍和恶性肿瘤。自HIV被发明以来 ，科学家们即最先AIDS动物模子的研究事情 ，小鼠、兔及非人灵长类动物都曾用于AIDS动物模子的研究。凭证动物对HIV的敏感性及造模要领 ，AIDS动物模子分为非人灵长类动物模子、转基因小鼠模子及人源化小鼠模子。
非人灵长类动物由于饲养本钱高 ，且需要特殊的饲养情形 ，更主要的是现在针对灵长类动物的试剂很少 ，这些因素都限制了其在动物模子研究中的应用。相较量而言 ，啮齿类动物体型小、易于饲养、试剂泉源利便等因素决议了其在动物模子研究中有奇异的优势。
部分造模要领
使用动物：小鼠
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小鼠对HIV-1病毒不易感 ，HIV-1病毒不可在其体内增殖。爆发这种征象的缘故原由一是小鼠和人的CD4分子序列有差别 ，导致HIV-1囊膜卵白不可团结到鼠CD4+T细胞。也有研究发明HIV-1病毒序列中长最后重复序列(long terminal repeat,LTR)介导的转录活性在鼠源性细胞活性较低 ，这也是导致HIV-1病毒不可熏染小鼠的缘故原由之一。别的 ，HIV-1病毒的一些辅助调控卵白 ，如 ，核输出信号分子Rev在鼠源性细胞中的功效下降显着 ，不可有用介导HIV-1mRNA出核 ，从而影响病毒卵白翻译和包装。随着转基因手艺的生长 ，将HlV-1病毒受体CD4及其辅助受体CCR5和CXCR4基因融合后显微注射到小鼠受精卵细胞 ， 可制备表达人CD4-CCR5/CXCR4转基因小鼠 ，该小鼠由于表达HIV-1病毒受体及辅助受体 ，因而对HIV-1病毒的易感性提高 ，熏染后可体现出AIDS部分症状。将HIV-1病毒全序列或结构基因/调控基因克隆后通过显微注射要领也可建设表达HIV-1特异卵白的转基因小鼠。
【造模要领】：
通过显微注射要领建设的表达HIV-1病毒全序列或结构基因／调控基因的转基因小鼠可直接用于抗HIV药物筛选、疫苗评价等相关研究领域。300 TCID50的HIV-1病毒脾内接种或8000TCID50HIV-1病毒静脉接种CD4-CCR5转基因小鼠 ，2~4周后动物脏器中可检测到HIV-1病毒DNA。
【模子特点】：
1.表达HIV-1病毒序列转基因小鼠 HIV-1前病毒DNA序列显微注射到受精卵细胞后制备出可用于AIDS研究的转基因小鼠 ，子代动物中50%~80％体现为表皮增生、淋巴炎症、脾大及肺淋巴细胞浸润等病理体现 ，皮肤、脾脏及淋投合中可检测到HIV病毒颗粒。也有研究者用缺失Gag-Pol基因的HIV-1病毒基因序列制备AIDS转基因小鼠模子 ，该小鼠肾脏中可检测到HIV-1的特异性表达 ，后期小鼠可生长为有卵白尿症状的肾病体现 ，致死率较高 ，因此该小鼠用于HIV-1引起的肾病模子研究。表达复制缺陷性HIV-1的转基因小鼠也可生长有举行性肾小球硬化为体现的严重肾病综合征。表达Rev卵白的转基因小鼠肾小球硬化 ，表皮增生 ，小鼠皮肤组织中也可检测到病毒RNA。这些模子是研究HIV相关肾病的优异模子。研究发明用MMTV启动子取代HIV启动子后 ，Env卵白的gp160、gp120和Gag卵白的p55、p24在转基因小鼠体内表达上调 ，该征象尤其在哺乳期雌性小鼠中体现尤甚。
2.HIV-1 LTR转基因小鼠 机体熏染HIV-1后有较长的潜在期 ，临床症状泛起较晚 ，这与病毒转录活性亲近相关。研究发明一些外界因素（如细胞因子、紫外线等）及具有转录活性的调控元件可加速病毒的致病历程 ，基于此研究者用HIV基因中具有转录活性的LTR制备转基因小鼠 ，HIV-1LTR与报告基因大肠埃希菌氯霉素�；泼�(chloramphenicol transferase,CAT)某人抗胰卵白酶基因(α-1 antitrypsin,α-1-AT)融合后建设了转基因小鼠 ，该小鼠眼组织中CAT表达升高5倍 ，血清中α-1-AT表达上调10~20倍。在外界因素作用下 ， 如紫外线照射后 ，皮肤组织中CAT可上调30倍以上。表达HIV-1 LTR Tat的转基因小鼠可在皮肤组织中检测到LTR Tat RNA的表达 ，且在紫外线B或C作用下 ，皮肤LTR Tat RNA表达水平可达10倍以上。HIV-1熏染后可引起神经系统病变 ，如痴呆综合征等(AIDS dementia complex) ，且HIV-1病毒能否在神经元细胞中复制也不清晰 ，HIV-1 LTRLacZ转基因小鼠体内多个脏器均可表达LacZ RNA或卵白 ，尤其是脑、视网膜及中枢神经元细胞检测到LacZ RNA表达 ，这些效果批注HIV-1可在神经元细胞复制。
3.HIV调控卵白转基因小鼠
⑴Tat:Tat是HIV复制历程中主要的调控卵白 ，具有转录活性 ，有研究者以为Tat活性有一定的种属特异性 ，其转录活性只能在人源性细胞中具有 ，而在鼠源性细胞中不具备此功效。但表达HIV-1 LTR Tat的转基因小鼠批注Tat活性物种属特异性 ，小鼠可爆发皮肤损伤的临床体现 ，这点与AIDS患者卡波西肉瘤极为相似 ，皮肤病变及增生在雄性小鼠中可维待一年以上 ，凌驾18个月的雄性Tat转基因鼠肝癌爆发率大于其他动物。
⑵Nef:Nef卵白是一种负调控因子 ，能够增强病毒的复制能力和熏染性。Nef基因以人CD2T细胞特异性调控元件及其LCR调控后制备的转基因小鼠可显着降低外周血CD4+T细胞数目。别的 ，Nef基因在鼠T细胞受体Vβ8.3的β链增强子/启动子控制下制备的转基因鼠CD4+T细胞数目下降显着、胸腺萎缩、脾及淋投合肿大 ，大都动物在4~6个月内殒命。
4.表达CD4及CCR5和CXCR4转基因小鼠 CD4及CCR5和CXCR4是HIV病毒受体和辅助受体 ，前已叙述由于人CD4、CCR5和CXCR4与小鼠的这些分子序列差别可能导致小鼠对HIV-1不敏感。表达人CD4及其辅助受体CCR5的转基因小鼠外周血单核细胞及脾细胞中可检测到巨噬细胞嗜性HIV毒株 ，脾及淋投合均可检测到HIVDNA ，但病毒不可在这些组织中增殖。表达人CD4及CXCR4转基因小鼠对T细胞嗜性HIV较为敏感 ，外周血中CD4+T细胞数目下降显着。
【模子的评估和应用】：
目的基因通过显微注射或其他转基因要向导入到受精卵细胞后 ，可通过PCR或Southern blot要领检测目的基因在动物体内表达。转基因小鼠常用于HIV发病机制研究、抗HIV-1药物筛选及疫苗学研究等。
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