前言
结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是胃肠道中常见的恶性肿瘤 ，早期症状不显着 ，随着癌肿的增大而体现排便习惯改变、便血、腹泻腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状 ，晚期则体现血虚、体重减轻等全身症状。其发病率和病死率在消化系统恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌。近20年来 ，其发病率呈显着上升趋势 ，严重危害人类康健 ， 故结直肠癌研究逐步成为近年来医学研究的热门之一 ，由此引发的种种动物模子的研究备受关注。
基因敲除小鼠模子是使用转基因手艺 ，将抑制肿瘤爆发、生长及转移的相关基因人为地敲除 ，使之缺失 ，包括同源重组法和Cre/loxP诱导的条件敲除系统法。现在 ，基因敲除直结肠癌模子多是与多发性腺瘤样息肉病卵白(adenom-atous polyposi coli,APC)家族基因及遗传性非息肉性直结肠癌胚系错配修复基因MSH2、MLHI相关 ，由此研发出的基因工程小鼠模子在遗传性非息肉性结肠癌综合征(hereditary nonpolyposis colorectal cancer,HNPCC)和家族性多发性腺癌的研究中应用普遍 ，在直结肠癌的转移和药物治疗的实验中也起着主要的作用。
部分造模要领
使用动物：小鼠
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Min(multiple intestinal neoplasia)小鼠Min小鼠是具有肠道多发性腺瘤特征的Apc基因突变小鼠 ，被以为是目今较为理想的家族性腺瘤性息肉病(familial adenomatous polyposis,FAP)的研究模子。Apc基因是Wnt途径中主要的抑癌基因 ，该途径不但是动物胚胎发育历程中要害的信号转导途径 ，也对结直肠肿瘤的爆发生长起到差别寻常的作用。Min小鼠主要的遗传学特征是Apc,基因两条链中的一条链第850号密码子爆发无义突变 ，即第2549号碱基爆发颠换(T→A) ，编码亮氨酸的密码子(TTG)转酿成终止密码子(TAG) ，从而造成截断卵白 ，抑癌基因Apc不可有用地起作用。近年来 ，还发明了在Min小鼠中具有调理肿瘤数目的遗传位点：Mom1、Mom2、Mom7等位点 ，其中Mom1定位于4号染色体远端与人类染色体1p35-36高度同源 ，而在人类结直肠癌中该区域是常有杂合性缺失的一个区域。部分携带有Mom2基因的Min小鼠具有抑制肠道肿瘤的特征。
HNPCC小鼠模子 HNPCC是APC基因失活致杂化性缺失 ，错配基因(MLH-1、MLH-2、MLH-6、PMS-1、PMS-2)突变致基因不稳固。HNPCC基因特点为不稳固的短串联重复序列 ，也称微卫星 ，加入肿瘤后期的形成。使用基因剔除手艺 ，剔除纯合子小鼠MLH-1或MLH-2基因 ，淋巴细胞会爆发瘤变。同时也易患胃肠道的肿瘤 ，可以作为研究HNPCC很好的模子。
FAP限制性小鼠模子 随着新手艺的泛起 ，现在可以实现在特准时间和特定组织内 ，使体细胞基因激活或失活。例如Apc模子小鼠 ，Apc基因可因腺病毒熏染大肠表达Cre重组酶后被删除 ，从而抑制B连环卵白的条件表达 ，导致胃肠息肉的形成。
【模子特点】：
Min小鼠 ①Min小鼠肠道肿瘤容易泛起Apc杂合性缺失 ，即Apc等位基因中正常的那条Ape＋缺失 ，纵然在微腺瘤（为腺瘤早期肉眼不易发明的病变）中也可发明。经炎症诱发剂葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导 ，可以在Min小鼠大肠处快速形成肿瘤(4周以内） ，无论从形成数目照旧速率上 ，均比单独的未受任那里置的Min 小鼠要来的显着。②Min小鼠的优点为其腺瘤爆发、生长的遗传配景相同 ，无结肠肿瘤遗传异质性。③Min小鼠自然生涯期一样平常不凌驾120天 ，往往陪同着慢性血虚特征 ，体现为网织红细胞增多、红细胞计数镌汰。使用血虚特质可以筛选出Apc(Min/+)小鼠（准确率险些可以抵达100%）；纯合子的Apc(Min/Min)小鼠很是容易殒命 ，难以滋生 ，有些在母鼠子宫内就因不可正常发育而流产殒命。Min小鼠还常见黑便、脱肛、脾大以及高脂血症等体现。另外 ，部分雌性Min小鼠可形成乳腺肿瘤。最近也有报道 ，在致癌剂AOM的处置惩罚下Min小鼠容易爆发胃癌。因此 ，Min小鼠若加以修饰可能是对多种疾病举行研究的优异模子。
遗传性非息肉性结肠癌的小鼠模子 MLH-1-/-小鼠易患胃肠道肿瘤。MLH-2-/-基因缺陷的纯合子小鼠伴有APC基因的失活 ，易爆发淋巴瘤和肠内肿瘤。
FAP的限制性小鼠模子 限制性小鼠模子能很好地模拟FAP综合征 ，具有肿瘤自觉性、爆发率高及可展望性的特点 ，并且无免疫原性 ，能在免疫活性小鼠中生长。
【模子评估和应用】：
现在已建设的基因敲除模子 ，主要是针对APC家族基因以及遗传性非息肉性大肠癌胚系的错配修饰基因的 ，可是这些小鼠肿瘤的爆发历程与HNPCC结直肠癌有较大差别 ，现在尚无法应用于抗肿瘤药物的筛选和治疗研究 ，其应用价值需要进一步探讨 ，模子尚需一直优化。在转基因动物肿瘤模子中 ，肿瘤的爆发生长在理论上与原发肿瘤是一致的 ，且可对任何动物举行建模；但由于现在对癌基因及抑癌基因自己的研究尚有待深入 ，建设的模子还不敷理想 ，短期内很难普及 ，现在只能作为一种生长偏向 ，随着肿瘤发病机制的研究深入及转基因手艺的普及 ，本法将渐趋成熟。
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