前言
胰腺炎(pancreatitis)分为急性胰腺炎和慢性胰腺炎 。急性胰腺炎病情阴险、殒命率高，而慢性胰腺炎呈重复爆发的腹痛，且和胰腺癌关系亲近，故两者成为临床迫切需要解决的问题 。最近在许多动物模子上证实，急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)的发病缘故原由及严重水平和胆汁酸刺激、严重高甘油三酯血症、乙醇和溶血相关，机制上保存细胞膜通透性增添、酶原异常激活、炎症反应、细胞凋亡、内质网应激、氧化应激、游离脂肪酸毒性等多种病理途径 。慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)的特征是一连和重复的炎症反应导致纤维化等举行性的病理转变，最终内、外渗透组织破损 。在近期的动物模子研究上，证实炎症因子导致胰腺卫星细胞的增殖和释放细胞外基质，是纤维化加重的主要缘故原由，而神经免疫反应则加剧了疼痛反应 。乙醇是慢性胰腺炎最主要的发病因素，也在一系列模子上获得验证 。大宗转基因和基因敲除小鼠在急性和慢性胰腺炎实验研究中的应用，使胰腺炎的遗传相关因素以及分子机制的研究得以大宗地开展，胰腺炎和许多单基因的相关性逐步获得明确 。
现在，研究中应用最广的胰腺炎动物模子是啮齿类动物，如大鼠、小鼠，也有地鼠，其他动物也有报道 。自觉性胰腺炎的动物模子在研究中还未获得现实应用 。凭证造模要领，诱发性模子可分为非侵入法（饮食诱导、化学诱导等）和侵入法（逆行性胆管注射、胰管结扎或壅闭等）两大类模子，如图7-3所示 。当今的胰腺炎研究趋势越来越倾向于多种胰腺炎模子应用于统一个研究，以扫除模子特异性或动物种类特异性对实验效果的滋扰 。
图7-3 胰腺炎模子制备示意图
部分造模要领
使用动物：小鼠
雨蛙素诱发胰腺炎动物模子 雨蛙素(caerulein)是胆囊缩短素(cholecystokinin,CCK)的类似物 。胆囊缩短索是由33个氨基酸组成的多肽激素，主要心理作用是刺激胆囊缩短与奥狄括约肌松懈；增进肝胆汁渗透；调理小肠、结肠运动；刺激胰腺外渗透；作为脑肠激素调理摄食 。
【造�；啤浚�
过量给予雨蛙素，通过CCK受体，刺激胰腺腺泡细胞太过渗透，并使细胞内的胰卵白酶原和溶酶体水解酶疏散障碍，经组织卵白酶B依赖性的方法激活，胰酶的活性又能够进一步导致酶原激活，引起一系列卵白酶活性导致的细胞损害 。胰腺组织自我消化引起的炎症反应召募炎症细胞，释放炎症因子，进一步引起局部甚至全身性的严重炎症反应 。
急性胰腺炎的发病因素已经较量清晰，可以模拟人类疾病爆发的方法造模 。然而，慢性胰腺炎的发病机制至今还不清晰，使用急性胰腺炎重复爆发导致慢性胰腺炎的原理，多次重复诱导急性胰腺炎使胰腺体现纤维化等慢性胰腺炎病理特征，是慢性胰腺炎的一个基本造�；� 。
雨蛙素诱导胰腺炎时，往往团结应用增添胰腺炎易感性的因素，如内毒素、乙醇、高甘油三酯血症等 。
脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)是一种内毒素，它可以通过激活单核细胞进而释放细胞因子， 引起全身性炎症反应 。临床研究发明LPS水平与急性胰腺炎的严重水平亲近相关 。雨蛙素与LPS团结应用在建设胰腺炎模子时有协同作用 。LPS破损炎症介质的正常反应，进而生长局部的胰腺炎为全身性的严重性炎症反应，加重在雨蛙素诱发基础上的胰腺炎 。
乙醇可以增添胰腺的氧化应激、破损腺泡细胞的线粒体、使胰卵白酶原易活化，同时改变神经内渗透调理，使细胞殒命从凋亡向坏死转化，通过抗炎反应增进胰腺纤维化 。因此，岂论急性胰腺炎照旧慢性胰腺炎模子的制备，通过乙醇的应用可以增进其他要领诱导的胰腺炎 。
高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia)是急性胰腺炎的主要发病缘故原由，可是机制至今不清晰 。对高甘油三酯血症模子用雨蛙素举行胰腺炎诱导，已经被证实可以加重胰腺炎严重水平，可是只有严重高甘油三酯血症(>100mg/dl)模子才华视察到，这类模子很少 。现在除了脂卵白脂酶和其辅助因子GPIHBP1敲除小鼠，及其抑制剂ApoC3转基因小鼠具有严重高甘油三酯血症表型，只有地鼠可以通过喂饲要领造成严重高甘油三酯症 。另外，GPIHBP1敲除大鼠最近制备乐成，鉴于大鼠在急性胰腺炎研究中的优势，它有可能成为未来急性胰腺炎的最佳工具 。这些模子可以作为高甘油三酯血症性急性胰腺炎的研究工具 。
二氯二丁基锡(dibutyltin dichloride,DBTC)等二烷基锡可导致胆管上皮细胞破损，引起水肿增生，引起胰胆管梗塞，形成急性间质性胰腺炎，慢性炎症导致胰腺纤维化 。DBTC经常被和雨蛙素团结应用，造成较量典范的慢性胰腺炎模子 。
【造模要领】：
理论上讲，雨蛙素可以诱导大大都动物爆发急性胰腺炎，可是此类模子主要应用于啮齿类动物（如大鼠和小鼠） 。大鼠5~20µg/kg体重，4～6小时内每小时一次腹腔或皮下注射；小鼠20-50µg/kg体重，腹腔注射7次，每小时一次 。虽然地鼠不是常用的急性胰腺炎模子，但由于其在脂代谢方面的突出优势，研究发明其对雨蛙素诱导的急性胰腺炎同样敏感，凭证大鼠或小鼠的方法诱导均可 。
雨蛙素诱导的慢性胰腺炎是该模子制备的基本要领 。岂论哪种动物，多次诱导急性胰腺炎，每周一次一连数周密更长时间，将泛起较典范的慢性胰腺炎的病理体现 。小鼠照旧慢性胰腺炎模子中最常用的动物，由于基因修饰小鼠是慢性胰腺炎和单基因关系的主要研究工具 。
使用LPS团结雨蛙素诱导急性胰腺炎时，一样平常5~15mg/kg腹腔注射一次，在最后一次雨蛙素注射时加入或之后注射 。有报道雨蛙素团结LPS时，可镌汰一次雨蛙素注射 。
乙醇既可以单独也可以和雨蛙素团结应用诱导急性和慢性胰腺炎 。乙醇可以通过灌胃急性大宗给予 。若对小鼠举行实验，最大宗可以给到50%~60%乙醇100μl，一天4次，或20％乙醇10次／d 。在野生小鼠上，不诱着急性胰腺炎，也不加重雨蛙素诱导的急性胰腺炎 。恒久慢性给予乙醇是慢性胰腺炎制备常用的要领 。给予乙醇的方法最可靠的是Lieber-DeCarli饮食手艺，能够包管动物恒久摄取足量乙醇与营养，并有用扫除因恒久摄取乙醇而引起的营养障碍，Lieber-Decarli即是1963 年提出含全营养素和乙醇的液体食料，按热量配制卵白质18%、脂肪21%、碳水化合物47%(36％热量由乙醇取代），尚有一些维生素和无机盐等 。通常给予10周乙醇后，再增添LPS(3mg/kg)一周一次，一连3周，诱导慢性胰腺炎 。
雨蛙素团结DBTC制备慢性胰腺炎，大鼠应用较多 。DBTC溶在100％乙醇中，再用甘油稀释，按4.5mg/kg体重的剂量尾静脉注射一次 。也有用DBTC团结乙醇制备慢性胰腺炎模子的 。
【模子特点】：
注射雨蛙素后动物血浆淀粉酶、脂肪酶的峰值升高，幅度从几十倍到上千倍都有报道，可能和用药剂量和差别实验室测定要领差别有关 。胰腺组织水肿、炎性细胞浸润，同时伴有少鼠腺细胞坏死，有时有出血，经常在病理切片上看到胰腺组织有圆形的空泡 。血清和胰腺组织炎症因子表达水平增高 。细胞凋亡和自噬在这类模子的胰腺炎的病理机制中，差别的动物种类体现差别 。雨蛙素诱导胰腺炎的动物模子还可体现出典范的急性胰腺炎相关肺损伤，特殊是团结应用LPS 。
慢性胰腺炎模子的病理特点包括：外渗透和内渗透细胞的批的丧失，典范的慢性炎症特点，导管内卵白栓和钙化形成，疼痛敏感，以及胰腺纤维化 。
【模子评估和应用】：
由于雨蛙素诱导急性胰腺炎操作轻盈，实验周期短，重复性好，故已成为胰腺炎造模最常用的方法 。这类模子适用于研究急性胰腺炎的细胞生物学机制，在发病的遗传和情形因素研究中施展了主要作用 。现在已经报道的动物种类有大鼠、小鼠、狗、家兔和地鼠 。雨蛙素由于类似物CCK可以应用于体外实验研究，模拟雨蛙素的体内实验作用机制，因此更有利于细胞生物学研究 。雨蛙素诱导轻中度急性胰腺炎，可以自愈，因此用于早期细胞机制和腺泡细胞损伤修复研究，有利于视察新的防治要领的作用 。可是，在评价防治要领时，淀粉酶、脂肪酶不是敏感指标，生化指标方面要依赖炎症因子的测定，现在还没有很好的本钱较低、轻盈可行的要领 。
该模子需要注射大剂量的雨蛙素，本钱不低，诱导具有自限性的急性胰腺炎，小鼠相对更不敏感 。而差别品系的小鼠对雨蛙素诱导的胰腺炎的敏感性相较量，BALB/c、ICR小鼠较敏感，C57BL/6小鼠敏感性较差 。雨蛙素诱导的胰腺炎在统一品系中，也会有胰腺炎历程的少许的差别 。因此，这类模子应用时，必需有合适的比照组，并举行时间依赖性视察 。另外，该模子并不模拟人类常见的发病缘故原由，没有殒命终点，其他的介入性和严重性胰腺炎模子，在研究中经常需要作为增补性模子 。在注射雨蛙素的同时给予LPS刺激，一定水平上填补了简单使用雨蛙素建模的局限 。
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